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Title: Extratos de plantas medicinais do gênero piper como método de tratamento para o carcinoma de células escamosas de boca
Authors: Silva, Diego Pollo Dutra
metadata.dc.contributor.advisor: Robbs, Bruno Kaufmann
metadata.dc.contributor.members: Robbs, Bruno Kaufmann
Pascoal, Aislan Fagundes
Germano, Fabiana Nunes
Mendonça, Leonardo de Souza
Issue Date: 1-Jan-2018
Publisher: Universidade Federal Fluminense
Citation: Silva, Diego Pollo Dutra da. Extratos de plantas medicinais do gênero piper como método de tratamento para o carcinoma de células escamosas de boca (CCEB). 2017. 54f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biomedicina)-Instituto de Saúde de Nova Fribrugo, Universidade Federal Fluminense, 2017.
Abstract: Em 2015 o câncer foi considerado o segundo maior causador de óbitos no mundo, ocorrendo na maior parte em países de baixa e média renda. O câncer oral é altamente agressivo, e segundo o INCA, o número de casos vem aumentando a cada ano. Apesar da existência de métodos de tratamento para o Carcinoma de Célula Escamosa de Boca (CCEB), o desenvolvimento de novas terapias é altamente desejável. Estudos etnobotânicos de plantas do gênero Piper demonstraram funções populares para tratamento de câncer. Portanto, foram selecionadas algumas espécies desse gênero, ainda não estudadas no tratamento do câncer, para experimentação. As espécies Piper mollicomum, P. arboreum, P. truncatum, P. cabralanum e P. cernuum foram coletadas no estado do Rio de Janeiro e preparados extratos brutos metanólicos das folhas e caules, menos da P.cern e P. cabral, que tiveram somente folhas coletadas. Os extratos brutos metanólicos foram submetidos primeiramente a ensaios clonogênico onde foram selecionadas as plantas que tiveram pelo menos 50% de atividade. Posteriormente o efeito citotóxico destas plantas foi avaliada em ensaios de viabilidade celular por MTT. Dos extratos brutos, somente as folhas de Piper mollicomum (FPM), Piper cernuum (FPC) e Piper cabralanum (PCA) atingiram o IC50 em uma das concentrações testadas. Essas plantas então, foram submetidas ao particionamento químico em partições acetato de etila, diclorometano e hexano. Estas partições foram sujeitas a novos ensaios de MTT onde somente as frações diclorometano das três plantas foram capazes de atingir um IC50 nas menores concentrações, entre as que foram testadas (FPM-D, FPC-D e PCA-D). Estas foram levadas a ensaios de contagem e analise morfológica, e foi visto que ao elevar a concentração para 5x o IC50 a quantidade de células cai significativamente, e quanto a analise morfológica observou-se que as células adquiriram aspectos morfológicos sugestivos de morte apoptótica nas partições testadas. Por fim, realizamos o ensaio de permeabilização com as três partições e observamos que somente a FPC-D e a PCA-D aumentaram de forma considerável a quantidade de células permeabilizadas. Ao avaliar as três partições diclorometano quanto a seletividade, somente a FPC-D e a PCA-D demonstraram um IS considerável. Este conjunto de resultados mostra a atividade anticancerígena no CCEB e sugere que a FPC-D e PCA-D sejam submetidas a novos fracionamentos para isolar e identificar a molécula responsável pela indução de morte.
metadata.dc.description.abstractother: In 2015, cancer was considered the second largest cause of death in the world, occurring mostly in low- and middle-income countries. Oral cancer is highly aggressive and, according to INCA, the number of cases is increasing every year. Another worrying factor is the survival rate, which in 5 years of non-metastatic disease is less than 50%, with only 25% in metastatic disease. Despite the existence of treatment methods for oral squamous cell carcinoma (OSCC), the development of new therapies is highly desirable. Ethnobotanical studies of plants of the genus Piper have demonstrated popular functions for treating cancer. Therefore, some species of this genus, not yet studied in the treatment of cancer, were selected for experimentation. The species Piper mollicomum, P. arboreum, P. truncatum, P. cabralanum and P. cernuum were collected in the state of Rio de Janeiro and crude methanolic extracts from the leaves and stems were prepared, except P.cern and P. cabral, where only leaves were collected. The crude methanolic extracts were first submitted to clonogenic trials where plants with at least 50% of activity were selected. Subsequently the cytotoxic effect of these plants was evaluated in MTT cell viability assays where crude extracts were initially tested. Of these crude extracts only the leaves of Piper mollicomum (FPM), Piper cernuum (FPC) and Piper cabralanum (PCA) reached the IC50 in one of the concentrations tested. These plants were then subjected to chemical partitioning into ethyl acetate, dichloromethane and hexane partitions. The plants partitions were subjected to new MTT assays where only the dichloromethane fractions of the three plants were able to reach an IC50 at the lowest concentrations among those tested (FPM-D, FPC-D and PCA-D). Then, these were submitted to cell counting and morphological analysis, and it was seen that, by raising the concentration to 5x the IC50, the amount of live cells drops significantly and as for thermorphological analysis it was observed that the cells acquired morphological aspects that were suggestive of apoptosis-like cell death in all three partitions tested. Lastly, we performed the cellular permeabilization assay with the three partitions and observed that only FPC-D and PCA-D increased the amount of permeabilized cells considerably. When evaluating the partitions for selectivity, only FPC-D and PCA-D demonstrated a considerable IS. This set of results shows the anticancer activity in OSCC and suggests that FPC-D and PCA-D should be subjected to new fractionation with the intention to isolate and identify the molecule responsible for the induction of cell death.
URI: https://app.uff.br/riuff/handle/1/10643
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