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Title: Presença das proteínas de superfície com potencial vacinal PspA e Pili em amostras de pneumococos isoladas de colonização em crianças antes e após o uso de vacinas pneumocócicas conjugadas
Authors: Pereira, Patricia Alice Knupp
metadata.dc.contributor.advisor: Neves, Felipe Piedade Gonçalves
metadata.dc.contributor.advisorco: Póvoa, Helvécio Cardoso Corrêa
metadata.dc.contributor.members: Penna, Bruno de Araújo
Cerqueira, Aloysio de Mello Figueiredo
Oliveira, Laura Maria Andrade de
Cardoso, Nayara Torres
Issue Date: 2019
Abstract: As vacinas pneumocócicas conjugadas 10-valente (VPC10) e 13-valente (VPC13) foram introduzidas, via SUS ou em clínicas privadas, respectivamente, em Niterói/RJ no fim de 2010 para imunizar crianças. Essas vacinas, porém, não cobrem todos os sorotipos e, ainda, levaram ao fenômeno de substituição de sorotipos associados a colonização e doenças. Assim, a busca por alvos vacinais diferentes da cápsula polissacarídica torna-se importante. Nosso objetivo foi avaliar a presença de duas proteínas de superfície com potencial vacinal (PspA e pilus) em pneumococos isolados de colonização de crianças em Niterói antes e após o uso universal das VPCs. Foram analisadas 253 amostras, sendo 124 amostras de crianças do período pré-vacinal (dezembro/2009 a julho/2010) e 129 amostras do período pós-vacinal (setembro a dezembro/2014). As amostras foram previamente caracterizadas quanto ao tipo capsular e ao perfil de resistência. As amostras foram submetidas a detecção e tipificação da proteína PspA e dos pili tipo 1 (PI-1) e 2 (PI-2) por PCR. A família 3 (Fam3) da PspA foi encontrada em 124 (49%) amostras, seguida por Fam2 (n=98; 38,7%) e Fam1 (n=31; 12,2%). A maioria das amostras da PspA Fam1 pertencia aos sorotipos 6B e 6C/D (8/40; 25,8% cada), da Fam2 ao sorotipo 15B/C (12/25; 12,2%) e da Fam3 ao sorotipo 6A (17/22; 13,7%). Nove (81,2%) das 11 amostras do sorotipo 14, sete (70%) das dez amostras do sorotipo 17F e seis (66,7%) das nove amostras do sorotipo 16F apresentaram a PspA Fam2. Por sua vez, 17 (77,3%) das 22 amostras do sorotipo 6A possuíam a PspA Fam3. Cinco (16,1%) das 31 amostras da PspA Fam1, 37 (37,7%) das 98 amostras da PspA Fam2 e 31 (25%) das 124 amostras da PspA Fam3 foram sensíveis a todos os antimicrobianos testados. As amostras de todas as famílias de PspA apresentaram um aumento na frequência de resistência no período pós-vacinal para clindamicina, eritromicina, tetraciclina e penicilina; as amostras da Fam1 também apresentaram aumento na resistência ao cloranfenicol. A presença de PI-1 foi detectada em 42 (16,6%) amostras. A maioria das amostras com PI-1 (n=15; 35,7%) pertencia ao sorotipo 15B/C; porém, nove (81,8%) das 11 amostras do sorotipo 14 apresentaram PI-1. O gene do PI-2 foi detectado em oito (3,2%) amostras, das quais seis (75%) pertenciam ao sorotipo multirresistente 19A e ao sorotipo 19F; destas, cinco possuíam concomitantemente o gene do PI-1. De modo geral, não houve diferença significativa entre as prevalências das proteínas entre os períodos pré e pós-vacinais; contudo, 86 (43,9%) das 196 amostras oriundas de instituições públicas e 38 (66,7%) das 57 amostras provenientes de instituições privadas possuíam a PspA da Fam3 (p<0,01). As amostras da PspA Fam3 foram as prevalentes, mas aquelas da Fam1 apresentaram maior frequência de resistência aos antimicrobianos. A frequência de amostras apresentado genes de pili foi baixa, sobretudo PI-2. Foram observadas associações estatisticamente significativas de determinados sorotipos afamílias de PspA e pili, porém nenhuma família de PspA foi associada a sorotipos específicos. Por outro lado, o PI-2 foi associado ao sorogrupo 19, incluindo o sorotipo MDR emergente 19A. Nossos dados servem de base para auxiliar na escolha de possíveis alvos para novas formulações vacinais antipneumocócicas.
metadata.dc.description.abstractother: The 10-valent (PCV10) and 13-valent (PCV13) pneumococcal conjugate vaccine were introduced in Niterói/RJ in the end of 2010 to immunize children, via SUS or in private immunization clinics, respectively. However, these vaccines do not cover all capsular serotypes and their introduction resulted in serotype replacement in both colonization and disease. Thus, the search for vaccine targets other than the polysaccharide capsule is important. Our aim was to evaluate the presence of two surface proteins found to be potential vaccine candidates (PspA and pilus) among pneumococcal isolates associated with colonization. The isolates were recovered from children in Niterói before and after the universal use of PCVs. We analyzed 253 isolates, including 124 isolates from the pre-vaccine period (December/2009 to July/2010) and 129 isolates from the post-vaccination period (September to December/2014). The capsular types and the resistance profiles of the isolates were previously characterized. All isolates were subjected to the detection and typing of PspA and pili types 1 (PI-1) and 2 (PI-2) genes by PCR. The PspA family 3 (Fam3) was found in 124 (49%) isolates, followed by Fam2 (n=98, 38.7%) and Fam1 (n=31, 12.2%). Most PspA Fam1 isolates belonged to serotypes 6B and 6C/D (8/40, 25.8% each), Fam2 to serotype 15B/C (12/25, 12.2%) and Fam3 to serotype 6A (17/22, 13.7%). Nine (81.2%) of the 11 serotype 14 isolates, seven (70%) of the ten serotype 17F isolates and six (66.7%) of nine serotype 16F isolates showed PspA Fam2. Also, 17 (77.3%) of the 22 serotype 6A isolates had the PspA Fam3. Five (16.1%) of the 31 PspA Fam1 isolates, 37 (37.7%) of the 98 PspA Fam2 isolates and 31 (25%) of 124 PspA Fam3 isolates were sensitive to all antimicrobial agents tested. Isolates of all PspA families showed an increase in the resistance frequency in the postvaccination period for clindamycin, erythromycin, tetracycline and penicillin; Fam1 isolates also showed increased resistance to chloramphenicol. The presence of PI-I was detected in 42 (16.6%) isolates. Most (n=15; 35.7%) PI-1 isolates belonged to the 15B/C serotype. The PI-2 gene was detected in eight (3.2%) isolates, of which six (75%) belonged to the multidrug-resistant (MDR) serotype 19A and the serotype 19F; five of them carried concomitantly the PI-1 gene. In general, no significant difference was observed between the prevalence of PspA families or pilus types and the periods investigated. However, 86 (43.9%) of the 196 isolates recovered from children at public institutions and 38 (66.7%) ofthe 57 isolates from children at private institutions had the PspAFam3 (p<0.01).PspA Fam3 isolates were the prevalent ones, but those of Fam1 presented a higher frequency of antimicrobial resistance. The frequency of isolates carry in pilus genes was low, especially PI-2. Statistically significant associations of some serotypes with PspA families and pilus types were observed, but no PspA family was associated with specific serotypes. In contrast, PI- 2 was associated with serogroup 19, including the emerging MDR serotype 19A. Our data may help the selection of targets for new anti-pneumococcal vaccine formulations.
URI: https://app.uff.br/riuff/handle/1/11854
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