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Title: Avaliação da liberação in vitro de citocinas e fatores de crescimento por membranas de fibrina rica em plaquetas e leucócitos
Other Titles: Evaluation in vitro of release of cytokines and growth factors by leucocyte-rich and platelet-rich fibrin membranes
Authors: Lourenço, Emanuelle Stellet
metadata.dc.contributor.advisor: Alves, Gutemberg Gomes
Issue Date: 2017
Abstract: Membranas de fibrina rica em plaquetas (PRF) são arcabouços baseados em fibrina, carreadores de células imunológicas e plaquetas, de larga utilização para fins terapêuticos. Neste trabalho, foram avaliadas sua estabilidade in vitro e sua capacidade de liberação gradual de citocinas e fatores de crescimento. Membranas produzidas em centrífugas de rotor horizontal a partir do sangue de 14 doadores foram avaliadas morfologicamente por microscopia eletrônica de varredura e microscopia de fluorescência, e sua estabilidade avaliada por registro fotográfico após incubação em meio de cultura por até 28 dias. A liberação de 27 citocinas e fatores de crescimento foi monitorada através de um imunoensaio multiparamétrico. As membranas de PRF apresentaram estrutura tridimensional complexa, com alta densidade células nucleadas. Grande liberação de fatores de crescimento (PDGF, FGFb e VEGF) foram detectadas nas primeiras 24 horas, seguida de decaimento tempo-dependente, mas ainda mantendo concentrações consideráveis após 3 semanas. Citocinas anti-inflamatórias (IL-10, IL-4 e IL1-RA) e Pró-inflamatórias (IL-6, TNF-alfa, IL-1b, IFN-g) apresentaram diferentes picos de liberação, mantendo altas taxas até 21 dias. Algumas citocinas (IL-2, IL-7, IL-9 e IL-17) tiveram concentrações não detectáveis. Quimiocinas de grande relevância no reparo tecidual (RANTES, GCSF) também foram produzidas em grande quantidade por todo o período experimental. Os resultados apontam para uma grande complexidade nos possíveis efeitos biológicos do PRF a médio prazo, que podem contribuir para uma melhor compreensão de suas aplicações clínicas em diferentes cenários
metadata.dc.description.abstractother: Platelet rich fibrin (PRF) membranes are fibrin-based, immunological cell and platelet-based scaffolds that are widely used for therapeutic purposes. In this work, PRF in vitro stability and its ability to gradually release cytokines and growth factors were evaluated. Membranes produced from the blood of 14 donors were morphologically evaluated by scanning electron microscopy and fluorescence microscopy, and their stability was evaluated by photographic recording after incubation in culture medium for up to 28 days. The release of 27 cytokines and growth factors was monitored through a multiparametric immunoassay. The PRF membranes presented complex three-dimensional structure with high density of nucleated cells. Large release of growth factors (PDGF, FGFb and VEGF) was detected in the first 24 hours, followed by time-dependent decay, but still maintaining considerable concentrations after 3 weeks. Anti-inflammatory cytokines (IL-10, IL-4 and IL1-RA) and pro-inflammatory cytokines (IL-6, TNF-alpha, IL-1b, IFN-g) presented different release peaks, maintaining high rates of elution for up to 21 days. Chemokines of great relevance in tissue repair (RANTES, G-CSF) were also produced in large quantities throughout the experimental period. The results point to a great complexity in the possible biological effects of PRF in the medium term, which may contribute to a better understanding of its clinical applications in different scenarios
URI: https://app.uff.br/riuff/handle/1/13160
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