Implementação da técnica de hibridização in situ por fluorescência em tumor sólido e análise de alterações cito-moleculares no gene FOXO1 em pacientes pediátricos com rabdomiossarcoma alveolar

Abstract

O rabdomiossarcoma (RMS) é um tumor raro, apresenta uma incidência de 10-15% dos tumores sólidos pediátricos e 6% de todas as malignidades em crianças. O RMS divide-se em dois principais subtipos, o rabdomiossarcoma alveolar (RMSa) e o embrionário (RMSe), que apresentam manifestações clínicas e biológicas distintas. O RMSa está associado com mau prognóstico, enquanto o RMSe geralmente está associado com um melhor prognóstico. Citogeneticamente, o RMSa apresenta em cerca de 80% dos casos translocações cromossômicas envolvendo o gene FOXO1, sendo a t(2;13)(q35;q14) em 60% dos pacientes e a t(1;13)(p36;q14) em 20% dos casos. Essas translocações resultam no aumento de expressão dos genes quiméricos PAX3-FOXO1 e PAX7-FOXO1, respectivamente. Devido à importância da presença do biomarcador FOXO1 para o diagnóstico e tratamento de crianças com RMSa e sabendo que no INCA não existem estudos com abordagens citogenéticas e moleculares neste tumor pediátrico, pretendemos iniciar um estudo em RMSa, visando a caracterização da frequência de alterações cito-moleculares no gene FOXO1 em pacientes pediátricos matriculados no INCA. Foi realizado um estudo retrospectivo, no período de 2008 a 2014, em 19 pacientes pediátricos com RMSa. A média de idade dos pacientes foi de 8 anos, variando de 1 a 17 anos. Em relação ao sexo, 8 pacientes eram do sexo masculino e 11 do sexo feminino. Quanto à localização, a maior parte dos pacientes apresentou o RMSa na região da cabeça e pescoço, 74% do total de pacientes. Inicialmente padronizamos a metodologia de FISH. A técnica de FISH foi realizada utilizando a sonda LSI FOXO1 (13q14) Dual Color, Break Apart Rearrangement Probe (Vysis) em 19 amostras de RMSa. A frequência de alterações cito-moleculares no gene FOXO1 foi de 74% dos casos analisados (14/19). Foram observadas alterações envolvendo o gene FOXO1 do tipo translocação, amplificação e translocação/amplificação. Nossos resultados confirmaram a importância do estudo através do FISH envolvendo o gene FOXO1, como um biomarcador de diagnóstico e prognóstico. Através dessa pesquisa translacional (da bancada para a clínica), estabelecemos um teste diagnóstico adicional, a citogenética molecular - FISH para os pacientes pediátricos atendidos no INCA.