CARACTERIZAÇÃO DA VIRULÊNCIA DE AMOSTRAS DE "LACTOBACILLUS" SPP., ISOLADAS DE DENTINA CARIADA DE CRIANÇAS, IDENTIFICADAS ERRONEAMENTE COMO "ENTEROCOCCUS FAECALIS"

Abstract

A cárie dentária é uma doença complexa, multifatorial, polimicrobiana e induzida pela formação de biofilme que leva à desmineralização da superfície dentária. As bactérias presentes na lesão de cárie profunda podem ser fontes primárias para as infecções endodônticas e "Enterococcus faecalis" é comumente encontrado nestas infecções. Este estudo caracterizou a virulência de bactérias isoladas de dentina cariada de crianças, inicialmente identificadas como "E. faecalis". Oito amostras isoladas da dentina de 15 molares cariados, que cresceram no meio seletivo para "Enterococcus" e foram identificadas, por PCR, como "E. faecalis" foram incluídas no estudo. As amostras foram sujeitas à identificação por MALDI‐TOF MS e caracterizadas com relação a: (i) agregação bacteriana e formação de biofilme sobre vidro e poliestireno, na presença/ausência de saliva e/ou "Streptococcus mutans"; (ii) pH do meio antes e após 24 h de incubação; (iii) acidogenicidade; (iv) produção de gelatinase; (v) aderência a macrófagos; e (vi) toxicidade ao Caenorhabditis elegans. Análises estatísticas foram realizadas através dos testes exato de Fisher ou ANOVA bidirecional seguido de Tukey. Todas as 8 amostras identificadas como "E. faecalis" pela PCR apresentaram-se como "Lactobacillus" pelo MALDI-TOF MS, sendo designadas "Lactobacillus" erroneamente identificados como "Enterococcus" (do inglês, "Lactobacillus" misidentified as "Enterococcus" - LME). Todas as amostras LME foram produtoras de biofilme na presença de saliva, assim como na presença de "S. mutans". Porém, a agregação bacteriana foi observada apenas na presença de "S. mutans". Após 24 de incubação, o pH do meio caiu de 7,5 para 4,5 para 7 das 8 amostras LME, e para 4,0 quando estes microrganismos encontravam-se na presença de "S. mutans". Todas as amostras LME foram: acidogênicas (sendo 5 mais acidogênicas que "S. mutans" - p < 0.05); não produtoras de gelatinase; não aderentes a macrófagos e tóxicas ao "C. elegans". As amostras LME apresentaram importantes características de virulência, como formação de biofilme e alta acidogenicidade, fatores responsáveis pela desmineralização do esmalte dental, que podem aumentar o risco de cárie em crianças portadoras de LME. Vale ressaltar que a caracterização dos fatores de virulência dos microrganismos isolados de cárie dentária é importante no entendimento da dinâmica desta doença.