Análise da expressão do antígeno cutâneo associado ao linfócito e da expressão da selectina-e nas lesões de líquen plano oral através da imunofluorescência

Abstract

O Líquen Plano Oral (LPO) é uma doença autoimune inflamatória crônica, afeta aproximadamente 0,1 a 2% da população, na maioria mulheres, entre a quinta e sexta décadas de vida. Acredita-se que os linfócitos T CD8+ desempenhem um papel fundamental na manifestação da doença. Os antígenos cutâneos associados aos linfócitos (CLA) migram preferencialmente para a pele através da interação com a selectina-E. Possivelmente nas lesões de LPO a maior expressão do CLA está diretamente relacionada a maior expressão da selectina-E. Assim, como a pele é afetada por doenças crônicas autoimunes como o líquen plano, é interessante determinar se os linfócitos T CLA+ são expressos na mucosa oral assim como na pele. Dessa forma, esse trabalho se propõe a analisar a expressão do CLA nas áreas de líquen plano oral e verificar se existe correlação com a expressão da selectina-E através da imunofluorescência. Os pacientes foram selecionados do ambulatório de Diagnóstico Oral do Hospital Universitário Antônio Pedro através de uma abordagem direta, foram informados por escrito dos objetivos do estudo, seus riscos e benefícios e assinaram um termo de consentimento para a participação. Foi preenchido um questionário de anamnese. Todos os pacientes tinham mais de 18 anos de idade e preencheram os critérios clínicos e histopatológicos para LPO. Foram excluídos gestantes, lactantes e os que não preencheram um dos critérios clínicos ou histopatológicos para LPO. Foi realizada uma única biópsia em cada paciente em mucosa jugal, englobando uma área de LPO (GLPO) e uma área clinicamente livre de lesão (GPL). O material obtido foi congelado a -80oC em OCT e posteriormente, obtidas secções de tecido com 6 μm de espessura. A coloração pela hematoxilina e eosina (H&E) foi realizada para o diagnóstico histopatológico bem como avaliar a intensidade do infiltrado inflamatório. Foi realizada a imunofluorescência utilizando os seguintes anticorpos: CD3, CD4, CD8, CD62E e CLA. Foi utilizado o programa Image J para análise da imunomarcação CD3, CD4, CD8 e CLA, e uma contagem visual para CD62E. A análise estatística foi realizada através do programa SPSS 17.0 e análise descritiva para os dados demográficos e características clínicas. Foram selecionados 11 pacientes do total de 37, na maioria mulheres (90,9%), idade média 52,2 anos, e 54,2% eram pardos. Os sítios mais acometidos foram mucosa jugal (100%) e língua (80%). Os padrões clínicos mais comuns foram o reticulado (100%) e o placa (90%). A histopatologia demonstrou em todos os casos infiltrado inflamatório em faixa, degeneração hidrópica da camada basal e ausência de displasia. A imunofluorescência demonstrou no GLPO em relação ao GC um predomínio de células CD3+CD8+ (p=0,003), CD8+CLA+ (p=0,004) e de CD62E (p=0,003). No GLPO houve um predomínio de CD3+CD8+ (p=0,01) e ligeiro predomínio de CD8+CLA+(p>0,05). As correlações entre CD3+ ou CLA e o CD62E foi fraca (p>0,05). A correlação entre o CLA e o CD62E foi fraca, não apresentando significância estatística. Os resultados indicam que tanto o CLA como a selectina-E parecem estar envolvidas e são importantes no mecanismo etiopatogênico do LPO porém uma outra molécula de adesão vascular pode ter importância na emigração destes linfócitos