Investigação fenotípica e genotípica da ocorrência de produção de metal-beta-lactamases em amostras de pseudomonas aeruginosa isoladas na cidade de Aracaju, SE

Abstract

Pseudomonas aeruginosa é a espécie de maior importância clínica entre os bacilos Gram negativos não-fermentadores. Esses micro-organismos são importantes agentes de infecções relacionadas com o cuidado em saúde. Uma característica marcante das infecções causadas por P. aeruginosa, especialmente naquelas adquiridas por pacientes internados em Unidades de Tratamento Intensivo, é a multirresistência. P. aeruginosa possui mecanismos intrínsecos de resistência frente a diferentes antimicrobianos, como a maioria dos -lactâmicos, tetraciclinas, cloranfenicol, quinolonas e aminoglicosídeos, devido à combinação da baixa permeabilidade da sua membrana externa com a presença de sistemas de bomba de efluxo. Além disso, esses micro-organismos têm adquirido mecanismos de resistência, como a produção de metalo-beta-lactamases, com atividade contra os carbapenêmicos, restringindo ainda mais as opções terapêuticas para o tratamento de infecções graves causadas por essas bactérias. No presente trabalho, foram estudadas 95 amostras de P. aeruginosa isoladas em três instituições de saúde de Aracaju e identificadas através do sistema automatizado Vitek 2. Os objetivos foram: avaliar os perfis de susceptibilidade de amostras de P. aeruginosa isoladas no município de Aracaju, SE; detectar fenotipicamente a produção de metalo-β-lactamases entre as amostras resistentes a ceftazidima; caracterizar o genótipo de resistência das amostras resistentes a ceftazidima; avaliar a diversidade genética das amostras resistentes a ceftazidima. O sítio de isolamento mais freqüente foi o trato respiratório inferior (25,3%, 24/95). Em relação ao setor de isolamento, a maioria das amostras avaliadas (62,1%, 59/95) foi oriunda de pacientes admitidos em Unidades de Tratamento Intensivo. A análise dos perfis de susceptibilidade mostrou um percentual alto de resistência em relação à ceftazidima (51,6%, 49/95) e taxas moderadas em relação aos carbapenêmicos testados (imipenem: 23,2%, 22/95; meropenem: 20%, 19/95). A menor taxa de resistência observada foi frente à amicacina (16,8%, 16/95). Os testes de disco-aproximação para investigação da produção de metalo-β-lactamases entre as amostras resistentes a ceftazidima revelaram que 28,6% das amostras (14/49) foram positivas. Os testes de disco combinado confirmaram os resultados obtidos pelo método de disco-aproximação (13/49) e revelaram mais três amostras, totalizando 35,6% (17/49) amostras metalo-β-lactamase positivas. De acordo com os resultados obtidos na PCR, duas amostras (4,1%) entre aquelas resistentes a ceftazidima possuíam o gene blaSPM-1. Nenhuma amostra apresentou os determinantes genéticos blaIMP-1, blaVIM-2, blaGIM-1. A técnica de PFGE, realizada em 49 amostras resistentes a ceftazidima, revelou a ocorrência de uma elevada diversidade genética (37 pulsotipos). Também foi observada a presença de nove grupos clonais, compostos por duas ou três amostras cada, sendo que as amostras SPM-1 positivas foram geneticamente relacionadas entre si e com o clone São Paulo epidêmico no nosso meio. Os resultados sugerem que a produção de metalo-beta-lactamases não seria o principal mecanismo de resistência à ceftazidima e/ou aos carbapenêmicos entre as amostras estudadas. A ocorrência de grupos clonais compreendendo amostras isoladas em diferentes instituições de saúde e diferentes setores dentro da mesma instituição sugere a disseminação inter e intra-hospitalar durante o período estudado.