Avaliação do potencial antiviral de extratos extraídos da folha da myrciaria floribunda na replicação do virus herpes simples tipo 1

Abstract

Os vírus herpes simples tipo-1 (HSV-1) são patógenos que infectam diferentes hospedeiros podendo causar infecções mucocutâneas, ceratoconjutive, vesículas no trato bucal, ulcerações dolorosas, encefalite em pacientes imunocomprometidos e recém-nascidos bem como infecções genitais e ceratoconjutivite. A transmissão do HSV-1 ocorre pelo contato íntimo de um indivíduo suscetível com as secreções de um hospedeiro portador da infecção ativa. O aciclovir é o medicamento de referência no tratamento destas infecções. Porém, o aparecimento de cepas HSV-1 resistentes aos antivirais, como o aciclovir, torna a busca por novas moléculas, especialmente com diferentes mecanismos de ação, uma constante urgência. Vários dados da literatura têm mostrado que em estágios iniciais da infecção viral ocorre alteração da atividade da enzima Na+ , K+ ATPase (NKA) e que as alterações nos níveis de cátions intracelulares (Na+ e K+ ) afetaria o mecanismo de replicação viral. Trabalhos recentes mostraram também o efeito anti-herpes de inibidores clássicos da NKA, como a ouabaína. Além disso, alguns estudos mostraram que a atividade antiviral dos inibidores poderia ocorrer pela ativação da cascata de sinalização celular via Src/PI3K-PDK1. Buscando entender a relação entre a atividade antiviral e NKA; o objetivo desse estudo foi avaliar o potencial antiviral de substâncias naturais extraídas da folha de myrciaria floribunda e uma nanoemulsão na replicação do HSV-1 correlacionando a atividade antiviral com o possível efeito inibidor da NKA e com alterações iônicas intracelulares. Nossos resultados mostraram que os extratos obtidos a partir da folha da Myrciaria floribunda apresentaram atividade antiviral com pequena citotoxicidade a partir de 6.25 μg/mL, já a namoemulsão apresentou atividade antiviral com pequena citotoxicidade apenas em 25μg/mL e 12.5μg/mL. Nos experimentos da atividade virucida apenas a nanoemulsão não foi capaz de inativar a partícula viral em nenhuma das concentrações. O ensaio curso temporal da infecção mostrou que todos os extratos testados nas concentrações de 1.56 μg/mL e 3.12 μg/mL, apresentaram maior inibição durante a fase de adsorção da partícula viral. A atividade da enzima NKA purificada de medula renal de porco também foi inibida pelos extratos nas concentrações de 1.56 μg/mL e 3.12 μg/mL. Além disso, a alteração extracelular nas concentrações iônica de Na+ e K+ interferiram sobre a replicação viral. O estudo do efeito sinérgico mostrou que todas as misturas em concentração final de 1.56 µg/mL, proporção de 1:1, com excessão da combinação entre o extrato diclorometano e extrato hexânico apresentaram atividade antiviral maior do que a observada quando os extratos foram testados separadamente. A análise da atividade antiviral sobre o HSV-1 resistente ao aciclovir, cepa PAAR’5, mostrou que apenas o extrato butanólico e aciclovir (6,25 µg/mL) não apresentaram atividade antiviral significativa. Apesar das evidências indicarem que o mecanismo de ação antiviral dos extratos analisados estaria relacionado a atividade da NKA ainda são necessários mais estudos para entender se a atividade antiviral via inibição da NKA estaria relacionada ao bloqueio do transporte iônico ou ativação da sinalização celular.