Uso de trans-anetol purificado na criopreservação de sêmen ovino

Abstract

A criopreservação de sêmen associada à inseminação artificial torna mais eficiente a propagação de características zootécnicas de interesse. No entanto, esse processo leva ao estresse oxidativo dos espermatozoides, reduzindo sua viabilidade. O trans-anetol, um antioxidante natural encontrado em plantas, parece melhorar a sobrevivência dessas células durante a criopreservação de sêmen. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de diferentes concentrações de trans-anetol purificado no meio de criopreservação de sêmen ovino. Para isso, seis carneiros foram submetidos a coleta seminal via vagina artificial por sete dias. Ejaculados com motilidade espermática ≥80% (n=30) foram diluídos individualmente com meio Tris-Gema, e divididos nos seguintes tratamentos, de acordo com a concentração de trans-anetol adicionado ao meio: CONT (0 µM), AN10 (10 µM), AN50 (50 µM) e AN100 (100 µM). O sêmen foi congelado em máquina própria e descongelado a 37 °C por 30 s. Análises foram realizadas no momento da diluição (cinética espermática, integridade de membrana plasmática, hiposmótico e atividade mitocondrial) e imediatamente após o descongelamento (cinética espermática, integridade de membrana plasmática, hiposmótico, atividade mitocondrial, status acrossomal, ligação à membrana perivitelínica e lipoperoxidação). Os dados foram analisados usando um modelo misto linear generalizado. Após o descongelamento, o grupo AN100 apresentou melhores resultados (P < 0,05) nos parâmetros de motilidade progressiva e espermatozoides com velocidade média, quando comparado aos outros grupos. Além disso, AN100 também apresentou mais espermatozoides com velocidade rápida que o CONT e AN10 (P < 0,05). No teste de ligação à membrana perivitelínica, AN100 e AN50 tenderam a ter (P = 0,08) mais espermatozoides ligados à membrana. Por outro lado, no teste hiposmótico, AN100 apresentou menos espermatozoides com membrana ativa quando comparado aos grupos CONT e AN10 (P < 0,05) e maiores níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) do que AN10 e AN50 (P < 0,05). O AN10 foi o grupo que apresentou menores níveis de TBARS quando comparado aos grupos CONT e AN100 (P < 0,05). Assim, é possível afirmar que concentrações de 10 e 50 µM de trans-anetol no diluidor possuem efeitos positivos nos espermatozoides ovinos, aumentando sua motilidade progressiva, habilidade de ligação à membrana, além de possuir efeito antioxidante na criopreservação de sêmen, mas sua alta concentração parece afetar a membrana dessas células.