Caracterização da resistência a quinolonas em micobactérias de crescimento rápido de importância médica

Abstract

As micobactérias de crescimento rápido (MCR) estão amplamente distribuídas no ambiente, tendo emergido como agentes de infecção pós-cirúrgica. Recentemente, foram relatados no Brasil surtos de infecções por Mycobacterium massiliense em pacientes submetidos a procedimentos invasivos, nos quais os instrumentais médicos não sofreram esterilização e desinfecção adequadas. As quinolonas representam uma opção para o tratamento de infecções por MCR, sendo sugeridas para a terapêutica de infecções por algumas espécies. Seu mecanismo de ação envolve a interrupção da replicação do DNA pela formação de um complexo com a DNA girase. Essa enzima é constituída de 2 subunidades A e 2 subunidades B codificadas, respectivamente, pelos genes gyrA e gyrB. Alterações em aminoácidos nas regiões determinantes da resistência a quinolonas (RDRQ) de gyrA e gyrB implicam em resistência a quinolonas pela redução da interação com a DNA girase. Com o objetivo de caracterizar a resistência a quinolonas em MCR, as atividades in vitro de quinolonas de diferentes gerações foram determinadas por microdiluição em caldo em 54 cepas de M. massiliense, incluindo 43 cepas pertencentes ao clone BRA100 e duas cepas não clonais, isoladas no estado do Rio de Janeiro, e 9 cepas isoladas em diferentes estados do Brasil. Cepas de referência de M. abscessus, M. chelonae, M. fortuitum, M. massiliense e M. smegmatis também foram incluídas no estudo. Além disso, as sequências peptídicas das RDRQ de gyrA e gyrB foram obtidas por sequenciamento de DNA em 40 cepas dessa mesma espécie, incluindo 38 pertencentes ao clone BRA100, isoladas no estado do Rio de Janeiro. Todas as 54 cepas apresentaram resistência a todas as gerações de quinolonas, mas entre espécies diferentes de MCR houve variação na susceptibilidade a essa classe de antimicrobianos. As 40 cepas sequenciadas tiveram os mesmos aminoácidos nas RDRQ, incluindo a Ala-83 em gyrA e Arg-447 e Asp-464 em gyrB, já descritos como responsáveis por uma resistência intrínseca a quinolonas em micobactérias. Considerando esses aspectos, as quinolonas podem ser ativas in vitro contra MCR como M. fortuitum, M. chelonae e M. smegmatis, mas não devem utilizadas para o tratamento de infecções por M. massiliense. A resistência a quinolonas em M. massiliense apresentou, nas RDRQ gyrA e gyrB, os mesmos mecanismos de resistência em cepas de clones diferentes, mas outros mecanismos podem estar envolvidos com a resistência a altos níveis desses antimicrobianos.