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Title: Obtenção de um insumo farmacêutico ativo vegetal a Partir de folhas de eugenia florida DC para o desenvolvimento de um antitumoral
Authors: Nóbrega, Andréa Bezerra da
metadata.dc.contributor.advisor: Paiva, Selma Ribeiro de
metadata.dc.contributor.advisorco: Slana, Glaucia Barbosa Candido Alves
metadata.dc.contributor.members: Futuro, Débora Omena
Figueiredo, Maria Raquel
Chedier, Luciana Moreira
Carvalho, Edison Luís Santana
Oliveira, Rodrigo Rodrigues de
Issue Date: 19-Feb-2018
Abstract: Eugenia florida DC, espécie nativa da Mata Atlântica que pertencente à família Myrtaceae, apresenta, na sua composição química, dentre outros constituintes, o ácido betulínico (AB), um triterpeno com vasta literatura acerca de sua atividade antitumoral. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a viabilidade do desenvolvimento tecnológico de insumos ativos vegetais a partir das folhas de E. florida. Foi feita caracterização da matéria-prima vegetal, que, dentre outros resultados, demonstrou: (i) como caracter de diagnose da droga vegetal, a célula de topo reniforme que recobre a estrutura secretora, (ii) ausência de contaminação microbiológica: (iii) eficiência dos métodos de processamento e armazenagem dados pelos estudos de integridade. Estudos de prospecção química corroboraram dados da literatura, evidenciando a produção de flavonoides, taninos, antraquinonas, terpenos e cumarinas pela espécie vegetal. A avaliação farmacológica de extratos, frações e substância pura (AB) demonstrou resultados promissores para a linhagem tumoral de mama (MCF-7), com TGI=16,3 μg/mL para o extrato metanólico bruto de folhas de E. florida obtido por maceração, com resultado melhor que o encontrado para o padrão de AB (TGI=39,0 μg/mL). A atividade antioxidante, avaliada através do sequestro do radical livre DPPH, demonstrou grande potencial na produção de substâncias capazes de neutralizar a ação de radicais livres, o que pode corroborar com a atividade antiproliferativa. Um método por CLAE foi validado para determinação qualitativa e quantitativa do marcador AB cuja concentração mínima sensível ao método foi de 2,0 μg/mL. Extratos etanólicos foram produzidos e utilizados para obtenção de extratos secos através de métodos de liofilização, nebulização e granulação úmida. Os testes de caracterização físicoquímicos foram realizados com os insumos a fim de estabelecer parâmetros do produto, e foi possível observar melhores resultados para os insumos que utilizaram adjuvantes na composição. Estudos de estresse: temperaturas, hidrólise (ácida e alcalina), oxidação, fotólise, e ciclos de temperaturas foram realizados para avaliar o comportamento dos extratos, sendo observado, em alguns casos, a degradação do ácido betulínico. O estudo de estabilidade revelou que os insumos obtidos na forma de extratos liofilizado, nebulizado e granulado são estáveis quanto ao aspecto, perfil cromatográfico e marcador químico (AB), nas condições de estabilidade acelerada e longa duração preconizadas na RE n.1/2005, sugerindo-se, no mínimo, 12 meses de prazo de validade
metadata.dc.description.abstractother: Eugenia florida DC, a native species of the Mata Atlântica belonging to the Myrtaceae family. Its composition includes, among other constituents, betulinic acid (BA), a triterpene with a large literature about its antitumor activity. The present work had as objective the technological development of herbal active pharmaceutical ingredients from the leaves of E. florida. It was made the characterization of the vegetal raw material, which, among other results, demonstrated: (i) as a diagnostic character of the plant drug, the reniform top cell that covers the secretory structure, (ii) absence of microbiological contamination; (iii) efficiency of the processing and storage methods given by the integrity studies. Studies of chemical prospection corroborated data from the literature, evidencing the production of flavonoids, tannins, anthraquinones, terpenes and coumarins by the plant species. Pharmacological evaluation of extracts, fractions and pure substance (AB) showed promising results for the breast tumor line (MCF-7), with TGI = 16.3 μg / mL for the crude methanolic extract of E. florida leaves obtained by maceration, with a better result than the AB standard (TGI = 39.0 μg / mL). The antioxidant activity, evaluated by the free radical sequestration DPPH, showed great potential in the production of substances able to neutralize the action of free radicals, which can corroborate with the antiproliferative activity. A method by HPLC was validated for qualitative and quantitative determination of the AB marker whose minimum sensitivity to the method was 2.0 μg / mL. Ethanolic extracts were used to obtain dry extracts through lyophilization, atomization and wet granulation methods. The physical-chemical characterization tests were performed with the ingredients in order to establish product parameters, and it was possible to observe better results for the inputs that used adjuvants in the composition. Stress studies: temperatures, hydrolysis (acid and alkaline), oxidation, photolysis, and temperature cycles were performed to evaluate the behavior of the extracts, in some cases, the degradation of betulinic acid was observed. The stability study showed that the inputs obtained in the form of lyophilized, atomization and granulated extracts are stable in terms of appearance, chromatographic profile and chemical marker (AB), under the conditions of accelerated stability and long duration recommended in RE n.1 / 2005, suggesting a minimum, of 12 months of validity
URI: https://app.uff.br/riuff/handle/1/5750
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