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Title: Perfil de crescimento de genomoespécies de Leptospira spp. em diferentes meios de cultura
Authors: Silveira, Thaís Brasil
metadata.dc.contributor.advisor: Lilenbaum, Walter
metadata.dc.contributor.advisorco: Almeida, Ana Paula Loureiro de
metadata.dc.contributor.members: Neves, Felipe Piedade Gonçalves
Barros, Rosana Rocha
Martins, Gabriel Mendes de Souza
Issue Date: 2018
Publisher: Universidade Federal Fluminense
Abstract: Apesar de ser considerado padrão-ouro para o diagnóstico de leptospirose, o isolamento do agente a partir de amostras clínicas ainda é um desafio. A construção da curva de crescimento de uma população permite compreender a dinâmica populacional, seu tempo de geração e o número máximo de micro-organismos, entretanto poucos são os estudos atuais que abordam o desenvolvimento de novas técnicas de isolamento de leptospiras e meios de cultivo. O presente estudo buscou determinar o perfil de crescimento das espécies Leptospira interrogans (sorogrupos Icterohaemorrhagiae e Sejroe), L. santarosai, L. borgpetersenii e L. noguchii nos meios de cultura EMHJ, T80/40LH e Fletcher, com e sem a adição de 10% de Soro de Coelho, 1% de Albumina Bovina ou 0,1% de Piruvato de Sódio. Foi avaliada ainda a capacidade dessas estirpes se desenvolverem nestes meios de cultura com a adição dos coquetéis antimicrobianos STAFF, A5 e CH; a combinação resultou em 32 meios de cultura a serem avaliados. A avaliação foi feita por contagem manual em câmara de Neubauer a cada 48 horas. Foi identificado que L. interrogans, L. noguchii e L. santarosai, apresentam crescimento satisfatório em meio EMJH, com exceção de L. borgpetersenii a qual desenvolveu-se somente em meio T80/40LH. A adição de qualquer tipo de composto de enriquecimento não apresentou aumento significativo no crescimento daquelas espécies. Os coquetéis STAFF e A5 apresentaram resultados similares e garantiram um crescimento equivalente ao dos meios-base sem a observação do crescimento de outros micro-organismos contaminantes. Já o coquetel CHID inibiu o crescimento de todas as espécies quando adicionado a qualquer um dos meios avaliados. Conclui-se que o meio de cultura EMJH se mostrou mais eficiente para o crescimento das espécies L. interrogans, L. noguchii e L. santarosai, mas não para L. borgpetersenii. Para esta espécie, o meio-base T80/40/LH se mostrou o mais eficiente.
metadata.dc.description.abstractother: Although it is considered gold standard for diagnosis of leptospirosis, isolation of the agent from clinical specimens is still a challenge. The construction of the growth curve of a population allows the understanding of population dynamics, its generation time and the maximum number of microorganisms. However there are few recent studies that approach the development of new isolation techniques for leptospires and culture media. The present study aimed to determine the growth profile of L. interrogans (serogroup Icterohaemorrhagiae and Sejroe), L. santarosai, L. borgpetersenii and L. noguchii in the culture media EMJH, T80/40LH and Fletcher, with and without the addition of 10% Rabbit Serum, 1% Bovine Albumin or 0.1% Sodium Pyruvate. Ability to grow in these culture media was also evaluated with addition of antimicrobial cocktails STAFF, A5 and CH; combination resulted in 32 culture media being evaluated. Evaluation was done by manual counting in Neubauer chamber every 48 hours. It was identified that L. interrogans, L. noguchii e L. santarosai presented satisfactory growth in EMJH medium, except for L. borgpetersenii which was developed only in T80/40LH media. Addition of any type of enrichment compound did not show significant increase in growth of these species. STAFF and A5 cocktails presented similar results and ensured a growth equal to that of the base media without observing the growth of other contaminating microorganisms. The CHID cocktail inhibited the growth of all species when added to any of the evaluated media. We conclude that the EMJH culture medium was more efficient for the growth of L. interrogans, L. noguchii and L. santarosai, but not for L. borgpetersenii. For this specie, the T80/40/LH base medium was the most efficient.
URI: https://app.uff.br/riuff/handle/1/6995
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