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Title: Avaliação da atividade anti zika vírus de substâncias naturais obtidas de algas marinhas e da semente de urucum
Authors: Marinho, Robson dos Santos Souza
metadata.dc.contributor.advisor: Pinto, Ana Maria Viana
metadata.dc.contributor.members: Corrêa, Adriana de Abreu
Cavalcanti, Diana Negrão
Paula, Vanessa Salete de
Issue Date: 2018
Abstract: O Zika vírus (ZIKV) é um arbovírus emergente transmitido principalmente por vetores do gênero Aedes spp., pelas vias sexuais e congênitas. A febre do Zika ganhou destaque em 2015, quando atingiu proporções epidêmicas na América Central e do Sul e foi associada a um importante aumento no número de casos de doenças congênitas e desordens neurológicas no Brasil. Ainda não existe uma vacina contra o vírus e nem drogas eficientes no tratamento. Nessa perspectiva, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a citotoxicidade e a atividade anti ZIKV de substâncias naturais obtidas de algas marinhas (caulerpina e diterpeno 10,18-diacetoxy-8- hydroxy-2,6-dolabelladiene) e da semente de urucum (geranilgeraniol). A avaliação da citotoxicidade (CC50) foi realizada em diferentes células (Vero, HEK 293 eC6/36) por três metodologias diferentes: 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5diphenyl tetrazolium bromide (MTT), vermelho neutro (VN) e cristal violeta (CV). A avaliação da atividade antiviral in vitro foi realizada em célula Vero e determinada pela inibição da produção de virion pela técnica de Reed Müechen e pela inibição da produção de genoma viral pela técnica de One-Step RT-qPCR. A caulerpina e o diterpeno não foram citotóxicos para as células testadas, diferente do geranilgeraniol que foi citotóxico para as três linhagens celulares. Com base na diferença entre o título viral do controle não tratado com o título viral da amostra tratada com concentrações diferentes das substâncias pôde-se observar que as três moléculas reduziram o título viral, bloqueando a produção de virions. As três substâncias não apresentaram atividade inibitória na síntese de genoma viral. Assim, verificamos que a caulerpina, o 10,18-diacetoxy-8- hydroxy-2,6-dolabelladiene e o geranilgeraniol não bloqueiam a produção de genoma viral, mas bloqueiam a produção de virions possivelmente por outros mecanismos de ação. Em função do geranilgeraniol ser mais citotóxico, especulamos as substâncias caulerpina e diterpeno 10,18-diacetoxy-8-hydroxy-2,6-dolabelladiene como mais promissoras para um possível tratamento anti ZIKV.
metadata.dc.description.abstractother: The Zika virus (ZIKV) is an emergent arbovirus transmitted mainly by vectors of the genus Aedes spp., by the sexual and congenital routes. Zika fever became prominent in 2015 when it reached epidemic proportions in Central and South America and was associated with a significant increase in the number of cases of congenital diseases and neurological disorders in Brazil. There is as yet no viral vaccine or treatmenteffective drugs. In this perspective, the present work aimed to evaluate the cytotoxicity and anti ZIKV activity of natural substances obtained from seaweed (caulerpine and diterpene 10,18-diacetoxy-8-hydroxy-2,6-dolabelladiene) and annatto seed (geranilgeraniol ). Cytotoxicity evaluation (CC50) was performed in three different cells (Vero, HEK 293 and C6/36) by three different methodologies: 3- (4,5-dimethylthiazol- 2yl) -2,5diphenyl tetrazolium bromide (MTT), neutral red ) and violet crystal (CV). The evaluation of the antiviralin vitro activity was performed in Vero cell and determined by the inhibition of virion production by the Reed Müechen technique and by the inhibition of the viral genome production by the technique of One-Step RT-qPCR. Caulerpine and diterpene were not cytotoxic to the tested cells, unlike geranilgeraniol that was cytotoxic to the three cell lines. Based on the difference between the viral titer of the control not treated with the viral titer of the sample treated with different concentrations of the substances, it was observed that the three molecules significantly reduced the viral titer, blocking the production of virions. The three substances showed no inhibitory activity in viral genome synthesis. Thus, we find that caulerpine, diterpene 10,18- diacetoxy-8-hydroxy-2,6-dolabelladiene and geranylgeraniol do not block viral genome production but block viral production possibly by other mechanisms of action. Because geranilgeraniol is more cytotoxic, we speculate the substances caulerpine and diterpene 10,18-diacetoxy-8-hydroxy-2,6-dolabelladiene as more promising for a possible anti ZIKV treatment.
URI: https://app.uff.br/riuff/handle/1/9735
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