Investigações paleoparasitológicas em modelo experimental e material antigo: diagnóstico de artrópodes, parasitos transmitidos por vetores e helmintos intestinais

Abstract

A paleoparasitologia é definida como o estudo de parasitos em material antigo. O surgimento dos artrópodes data do período pré-Cambriano na Era Paleozóica e, portanto, são importantes no estudo paleoparasitólogico. Muitas destas espécies evoluíram para se tornarem ectoparasitos ou vetores de parasitos e microrganismos que causam agravos a saúde humana e animal até os dias atuais. A entomofagia já foi constatada como prática desde o período Paleolítico, assim a ingestão acidental ou intencional de vetores e ectoparasitos, torna os coprólitos (fezes antigas) importante fonte de estudos paleoparasitológicos. A análise de parasitos e outros microvestígios em amostras de sedimento ainda é escassa em estudos para identificação parasitológica, porém muitas espécies de parasitos necessitam do solo para o seu ciclo de vida, se fazendo necessário a inclusão deste tipo de amostra na paleoparasitologia. Os objetivos deste trabalho foram: (1) padronizar e identificar ectoparasitos e vetores em coprólitos experimentais por meio da reação em Cadeia de Polimerase e posteriormente aplicar a técnica em material antigo; (2) recuperar DNA de triatomíneos em coprólitos da América do Sul; (3) identificar por detecção molecular parasitos e microrganismos transmitidos por artrópodes: Trypanosoma cruzi, Rickettsia rickettsii, e Yersinia pestis em amostras antigas ósseas de sítios arqueológicos do Brasil; (4) identificar por análise morfológica a presença de artrópodes, helmintos e microvestígios em coprólitos e sedimentos da América do Norte. O estudo para análise de artrópodes em coprólitos experimentais foi padronizado com sucesso pela PCR convencional para Rhipicephalus sanguineus e Pediculus humanus capitis, podendo ser aplicado em material antigo em estudos futuros. Análises de coprólitos para identificação molecular de triatomíneos não resultou em sequências de boa qualidade. Não houve diagnóstico positivo para nenhum dos agentes etiológicos antigos pesquisados nas amostras antigas ósseas. Contudo, a análise de sequências resultantes das amplificações utilizando o primer para alvo de T. cruzi e Y. pestis resultou em sequência de três espécies de bactérias: Cutibacterium (Propionibacterium) acnes, Agrobacterium tumefaciens, com primers de T. cruzi; e Actinomyces sp., com primers de Y. pestis. A ocorrência destas bactérias pode ser endógena às amostras ou contaminação, em razão da manipulação das amostras durante a escavação e/ou armazenamento. Apesar da alta degradação, a análise dos artrópodes no sítio de Eagle Cave Texas foi positiva para a presença de artrópodes decompositores, considerados vetores-mecânicos. A análise do sedimento de La Cueva de Los Muertos Chiquitos foi positiva para Enterobius vermicularis, Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura e Toxocara sp. Este é o primeiro relato de Toxocara sp. na América do Norte pré-histórica. Nesta pesquisa foi mostrada a importância do trabalho experimental para estudos paleoparasitológicos, além da dificuldade do diagnóstico de microrganismos e artrópodes. A combinação de técnicas para diagnóstico é essencial para o estudo da ocorrência de parasitos em contexto arqueológico, principalmente para aqueles que não foram estudados previamente.